SUM159PT 人乳腺癌细胞系 培养传代介绍

SUM159PT 人乳腺癌细胞系 培养传代介绍

细胞介绍SUM159PT细胞来源于71岁女性的乳腺多样形癌,是埃塞俄比亚实验室得出的SUM系列细胞之一。SUM159PT细胞是一种超二倍体细胞,染色体模式数为47,带有HRAS、PIK3C、TP53等多种突变。

基本信息细胞别称:SUM-159-PT;SUM-159PT;SUM 159PT;

SUM-159;SUM 159;SUM159;159 PT;159PT

细胞来源:胸

细胞形态:上皮细胞样

生长特性:贴壁生长

安全等级:BSL1

包装规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

推荐换液:2~3次/周

倍增时间:~21.73 hours

传代比例:1:3~1:8

培养保存培养体系:RPMI-1640(TM175)+10% FBS (TS500)

培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%;温度:37℃

冻存条件:55% 基础培养基+40%FBS (TS500)+5%DMSO

传代步骤如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:4的比例进行。冻存步骤细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为5%,细胞密度不低于1x10(6)/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。细胞用途仅供科研使用。

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